3、操作步骤(1)样品处理①水溶性固体样品的处理(如白糖)：称取捣碎均匀样适量，用少量水溶解后转移到100mL容量瓶中，加0.5mol/L NaOH 4mL，摇匀，加0.5mol/L H2S044mL

3、食品操作步骤

(1)样品处理

①水溶性固体样品的添加处理(如白糖)：称取捣碎均匀样适量，用少量水溶解后转移到100mL容量瓶中，测定加0.5mol/L NaOH 4mL，白剂摇匀，测定加0.5mol/L H₂S0₄4mL，食品加Na₂HgCl₄20mL吸收，添加用水定容至100mL，测定过滤备用。白剂

②其他固体样品的测定处理(如粉条)：称取粉碎均匀样适量，少量水湿润，食品转移到100mL容量瓶中，添加加Na₂HgCl₄ 20mL吸收，测定浸泡4小时以上(若上层液不澄清，白剂要加入亚铁氰化钾及乙酸锌溶液各2.5mL)，测定用水定容至刻度，过滤，滤液备用。

③液体样品处理(如葡萄酒)：直接吸取5.0～lO.0mL样品，置于100mL容量瓶中，以少量水稀释，加20mL四氯汞钠吸收液，摇匀，最后加水至刻度，混匀，必要时过滤备用。

(2)标准曲线的绘制

吸取0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0mL二氧化硫标准使用液(相当于0.0，0.4，0.8，1.2，1.6，2.O，3.0，4.0μg二氧化硫)，分别置于25mL具塞比色管中。各加入四氯汞钠吸收液至10mL，然后再加入1mL氨基磺酸铵溶液(12/L)、1mL甲醛溶液(2/L)及1mL盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，放置15min。用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长550nm处测定吸光度，并绘制标准曲线。

(3)样品分析

吸取O.50～5.0mL样品处理液(视含量高低而定)于25mL具塞比色管中。按标准曲线绘制操作进行，于波长550nm处测吸光度，并与绘制标准曲线比较定量。

4、注意事项

①此反应的最适反应温度为20～25⁰C，温度低灵敏度低，所以标准系列管和样品在相同温度下显色；

②反应温度如果为15一16℃，静置时间需延长为20分钟；

③盐酸副玫瑰苯胺中的盐酸用量对显色有影响，加入盐酸量多，显色浅；加入量少，显色深，所以配制试剂时一定要按操作进行；

④甲醛浓度在0.15％～0.25％时，颜色稳定，所以应选择0.2％甲醛溶液；

⑤测定样品颜色较深的样品，可用10％活性炭脱色；

⑥样品加入Na₂HgCl₄吸收液于100mL容量瓶中加水至刻度，摇匀，此液在24小时内很稳定，否则于4℃可使用一周；

⑦此法测SO₂采用HgCl₂毒性很强，故实验时应注意安全。近几年有科技报道采用EDTA(乙二胺四乙酸)试剂代替四氯汞钠，但此实验没有证实过；

⑧亚硫酸与食品中的醛(乙醛等)、酮(酮戊二酸、丙酮酸)和糖(葡萄糖、果糖、甘露糖)结合，形成结合态亚硫酸，样品处理时加入氢氧化钠目的是使结合态的亚硫酸释放出来，加硫酸为了中和碱，保证显色反应在酸性条件下进行；

⑨亚硝酸对反应有干扰，加入氨基磺酸铵目的是去除亚硝酸的干扰。

(二)滴定法(葡萄酒中二氧化硫的测定)

1、原理

利用碘可以与二氧化硫发生氧化还原反应的性质，用碘标准溶液作滴定剂，淀粉作指示剂，测定样品中二氧化硫的含量，反应式如下：

I₂+SO₂+2H₂0==2I^-+S0₄^2-+4H⁺

2、试剂

①碘化钾、重铬酸钾。

②硫酸溶液(1+3)：取50mL硫酸(p约1.84g/mL)，慢慢加入到150mL水中。

③硫酸溶液(1+4)：取50mL硫酸(p约1.84g/mL)，慢慢加入到200mL。水中。

④硫代硫酸钠标准溶液,c(Na₂S₂O₃·5H₂O)=0.1mol/L。

a．配制：称取26g硫代硫酸钠(Na₂S₂0₃·5H₂0)(或16g无水硫代硫酸钠)，崩新煮沸且已冷却的蒸馏水溶解，并稀释至1000mL，混匀。贮于棕色瓶中，放两周后使用。

b．标定：称取0.15g于120⁰C烘至恒重的基准重铬酸钾，精确至0.0001g，置于碘量瓶中，加入25mL水使之溶解，加2g碘化钾及20mL硫酸溶液(1+4)，混匀，于暗处放置10分钟，加入150mL水，崩硫代硫酸钠标准溶液(0.1mol/L)滴定。近终点时加0.5mL淀粉指示剂溶液(10g/L)，继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。同时作空白试验。

参考资料：食品中有毒有害物质检测

相关链接：二氧化硫，亚铁氰化钾，硫代硫酸钠